1.項(xiàng)目背景
摘自《腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測(cè)試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則》
腦利鈉肽（BNP）是一種與心房鈉尿肽（ANP）功能類似的神經(jīng)激素類物質(zhì)，具有促尿排鈉并抵制交感神經(jīng)活性的作用，與心房鈉尿肽組織在學(xué)分布及氨基酸組成等方面卻存在著較大差異，故被作為另一種物質(zhì)，命名為BNP。
一系列研究發(fā)現(xiàn)：人體內(nèi)的 BNP 是由 BNP 氨基酸前體蛋白（proBNP）的 C 端裂解得到，而其N端則裂解形成僅有76個(gè)氨基酸的NT-proBNP即氨基末端腦利鈉肽前體。
BNP及NT-proBNP的基因差異很大，主要表現(xiàn)在兩者在體內(nèi)的清除途徑、半衰期等存在明顯的差異。
BNP及NT-proBNP在體內(nèi)主要通過肝腎清除。BNP的消除主要通過三種方式：一是與利鈉肽受體C在受體介導(dǎo)下相互結(jié)合后被清除；二是被中性肽鏈內(nèi)切酶切割而清除；三是通過被動(dòng)排泄被體內(nèi)的腎臟排泄清除。而相對(duì)于BNP來說NT-proBNP 在體內(nèi)并無上述前兩種主動(dòng)清除機(jī)制，僅能被限制在高血流量的器官內(nèi)，通過腎小球?yàn)V過的形式被動(dòng)清除，因此在體內(nèi)存留時(shí)間更長(zhǎng)，更易于檢測(cè)。
BNP及NT-proBNP 生物活性也不同。BNP 因具有一個(gè)特征性的氨基酸環(huán)，具有重要的生物活性，但在體內(nèi)的半衰期較短，僅有18—22分鐘；而 NT-proBNP 為直線形結(jié)構(gòu)，無生物活性，在體內(nèi)半衰期較長(zhǎng)，約120分鐘，且存在量不受體位及日?；顒?dòng)等因素的影響，含量穩(wěn)定。
由于BNP和NT-proBNP 主要是由左心室心肌細(xì)胞合成，在體內(nèi)等摩爾數(shù)產(chǎn)生后分泌進(jìn)入血液，兩者都可以作為一種有效的心衰標(biāo)志物，可單獨(dú)地預(yù)示心室壓力增高狀況，對(duì)于充血性心力衰竭及其引發(fā)的呼吸困難并發(fā)癥，原發(fā)性高血壓及其評(píng)價(jià)左心室功能障礙等心血管相關(guān)疾病的輔助診斷及治療評(píng)估監(jiān)測(cè)具有重要價(jià)值。
2.性能表現(xiàn)
2.1 化學(xué)發(fā)光（吖啶酯）平臺(tái)：
2.1.1 組合1：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：EKY0090L-1mg）包被羧基磁珠+氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：EKY0090M-1mg）標(biāo)記吖啶酯；
a. 線性范圍10pg/ml-35000pg/ml；
b. 試劑37℃熱加速7天穩(wěn)定性：發(fā)光值變化在±13%左右；
c. 企業(yè)工作校準(zhǔn)品（液態(tài)）37℃熱加速7天穩(wěn)定性：發(fā)光值變化在±15%左右。
2.1.2 組合2：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：EKY0090P-1mg）包被羧基磁珠+氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：EKY0090Q-1mg）標(biāo)記吖啶酯；
a.線性范圍10pg/ml-35000pg/ml；
2.2 組合：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：DKY0090N-1mg）標(biāo)記熒光微球+氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：DKY0090O-1mg）劃膜；
線性范圍：50pg/ml-35000pg/ml。
3. 臨床相關(guān)性
3.1 化學(xué)發(fā)光（吖啶酯）平臺(tái)：
與R品牌NT-proBNP試劑臨床相關(guān)性R2>0.96
低值部分（≤800pg/mL）與R品牌NT-proBNP試劑相關(guān)性R2>0.97。
3.2 熒光免疫層析（鑭系元素Eu螯合物填充）平臺(tái)：
高值部分與R品牌 NT-proBNP試劑臨床相關(guān)性R2>0.94；
低值部分（≤2500pg/ml）與R品牌 NT-proBNP試劑相關(guān)性R2>0.94。
4. 測(cè)試方案
4.1.1 化學(xué)發(fā)光（吖啶酯）平臺(tái)：
4.1.1組合1
待測(cè)抗原:NT-proBNP抗原（貨號(hào)：EKY0089E）,樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量20ul；
試劑1：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：EKY0090L-1mg）-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：EKY0090M-1mg）-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
4.1.2組合2
待測(cè)抗原:NT-proBNP抗原（貨號(hào)：EKY0089F）,樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量20ul；
試劑1：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：EKY0090P-1mg）-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：EKY0090Q-1mg）-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：孵育溫度37℃，樣本+試劑1+試劑2（10min）；
測(cè)試使用發(fā)光儀器:科斯邁SMART 500S；可使用于各類吖啶酯體系的化學(xué)發(fā)光儀器（如四川邁克、深圳亞輝龍、山東康華生物、基蛋生物、南京諾爾曼等）
4.2 熒光免疫層析（鑭系元素Eu螯合物填充）平臺(tái)：
待測(cè)抗原:NT-proBNP抗原（貨號(hào)：EKY0089E/EKY0089F）,加樣量10ul
反應(yīng)條件：樣本+熒光液混勻，上樣，反應(yīng)時(shí)間（10min-15min）；
測(cè)試使用熒光儀器:和邁 FIC-S100；可適用于各類熒光體系（激發(fā)波長(zhǎng)365nm，發(fā)射波長(zhǎng)615nm）的儀器（如廣州藍(lán)勃等）
5.產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 推薦配對(duì) |
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被 | EKY0090L-1mg | 氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：EKY0090L-1mg）包被羧基磁珠+氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：EKY0090M-1mg）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光配對(duì)組合1） |
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記 | EKY0090M-1mg | |
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被 | EKY0090P-1mg | 氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：EKY0090P-1mg）包被羧基磁珠+氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：EKY0090Q-1mg）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光配對(duì)組合2） |
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記 | EKY0090Q-1mg | |
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被 | DKY0090O-1mg | 氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記 （貨號(hào)：DKY0090N-1mg）標(biāo)記熒光微球+ 氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：DKY0090O-1mg）劃膜 （熒光層析配對(duì)組合） |
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記 | DKY0090N-1mg | |
NT-proBNP抗原 | EKY0089E | Calibrator or Quality Control |
NT-proBNP抗原 | EKY0089F | Calibrator or Quality Control |
氨基末端腦利鈉肽前（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：EKY0090L-1mg）-羧基磁珠濃縮液 | DKY1309A | |
氨基末端腦利鈉肽前（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：EKY0090M-1mg）-吖啶酯濃縮液 | DKY1309B | |
氨基末端腦利鈉肽前（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：EKY0090P-1mg）-羧基磁珠濃縮液 | DKY1309D | |
氨基末端腦利鈉肽前（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：EKY0090Q-1mg）-吖啶酯濃縮液 | DKY1309E | |
氨基末端腦利鈉肽前（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：DKY0090N-1mg）-羧基熒光微球濃縮液 | DKY1309C | |
羧基磁珠(超順磁)，1μm | DEG0091B-1-100mg | |
羧基磁珠(超順磁)，3μm | DEG0091A-3-100mg | |
時(shí)間分辨熒光微球，羧基（200nm） | AEG0786B |
1.項(xiàng)目背景
摘自《腦利鈉肽/氨基末端腦利鈉肽前體檢測(cè)試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則》
腦利鈉肽（BNP）是一種與心房鈉尿肽（ANP）功能類似的神經(jīng)激素類物質(zhì)，具有促尿排鈉并抵制交感神經(jīng)活性的作用，與心房鈉尿肽組織在學(xué)分布及氨基酸組成等方面卻存在著較大差異，故被作為另一種物質(zhì)，命名為BNP。
一系列研究發(fā)現(xiàn)：人體內(nèi)的 BNP 是由 BNP 氨基酸前體蛋白（proBNP）的 C 端裂解得到，而其N端則裂解形成僅有76個(gè)氨基酸的NT-proBNP即氨基末端腦利鈉肽前體。
BNP及NT-proBNP的基因差異很大，主要表現(xiàn)在兩者在體內(nèi)的清除途徑、半衰期等存在明顯的差異。
BNP及NT-proBNP在體內(nèi)主要通過肝腎清除。BNP的消除主要通過三種方式：一是與利鈉肽受體C在受體介導(dǎo)下相互結(jié)合后被清除；二是被中性肽鏈內(nèi)切酶切割而清除；三是通過被動(dòng)排泄被體內(nèi)的腎臟排泄清除。而相對(duì)于BNP來說NT-proBNP 在體內(nèi)并無上述前兩種主動(dòng)清除機(jī)制，僅能被限制在高血流量的器官內(nèi)，通過腎小球?yàn)V過的形式被動(dòng)清除，因此在體內(nèi)存留時(shí)間更長(zhǎng)，更易于檢測(cè)。
BNP及NT-proBNP 生物活性也不同。BNP 因具有一個(gè)特征性的氨基酸環(huán)，具有重要的生物活性，但在體內(nèi)的半衰期較短，僅有18—22分鐘；而 NT-proBNP 為直線形結(jié)構(gòu)，無生物活性，在體內(nèi)半衰期較長(zhǎng)，約120分鐘，且存在量不受體位及日常活動(dòng)等因素的影響，含量穩(wěn)定。
由于BNP和NT-proBNP 主要是由左心室心肌細(xì)胞合成，在體內(nèi)等摩爾數(shù)產(chǎn)生后分泌進(jìn)入血液，兩者都可以作為一種有效的心衰標(biāo)志物，可單獨(dú)地預(yù)示心室壓力增高狀況，對(duì)于充血性心力衰竭及其引發(fā)的呼吸困難并發(fā)癥，原發(fā)性高血壓及其評(píng)價(jià)左心室功能障礙等心血管相關(guān)疾病的輔助診斷及治療評(píng)估監(jiān)測(cè)具有重要價(jià)值。
2.性能表現(xiàn)
2.1 化學(xué)發(fā)光（吖啶酯）平臺(tái)：
2.1.1 組合1：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：EKY0090L-1mg）包被羧基磁珠+氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：EKY0090M-1mg）標(biāo)記吖啶酯；
a. 線性范圍10pg/ml-35000pg/ml；
b. 試劑37℃熱加速7天穩(wěn)定性：發(fā)光值變化在±13%左右；
c. 企業(yè)工作校準(zhǔn)品（液態(tài)）37℃熱加速7天穩(wěn)定性：發(fā)光值變化在±15%左右。
2.1.2 組合2：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：EKY0090P-1mg）包被羧基磁珠+氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：EKY0090Q-1mg）標(biāo)記吖啶酯；
a.線性范圍10pg/ml-35000pg/ml；
2.2 組合：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：DKY0090N-1mg）標(biāo)記熒光微球+氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：DKY0090O-1mg）劃膜；
線性范圍：50pg/ml-35000pg/ml。
3. 臨床相關(guān)性
3.1 化學(xué)發(fā)光（吖啶酯）平臺(tái)：
與R品牌NT-proBNP試劑臨床相關(guān)性R2>0.96
低值部分（≤800pg/mL）與R品牌NT-proBNP試劑相關(guān)性R2>0.97。
3.2 熒光免疫層析（鑭系元素Eu螯合物填充）平臺(tái)：
高值部分與R品牌 NT-proBNP試劑臨床相關(guān)性R2>0.94；
低值部分（≤2500pg/ml）與R品牌 NT-proBNP試劑相關(guān)性R2>0.94。
4. 測(cè)試方案
4.1.1 化學(xué)發(fā)光（吖啶酯）平臺(tái)：
4.1.1組合1
待測(cè)抗原:NT-proBNP抗原（貨號(hào)：EKY0089E）,樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量20ul；
試劑1：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：EKY0090L-1mg）-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：EKY0090M-1mg）-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
4.1.2組合2
待測(cè)抗原:NT-proBNP抗原（貨號(hào)：EKY0089F）,樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量20ul；
試劑1：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：EKY0090P-1mg）-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：EKY0090Q-1mg）-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：孵育溫度37℃，樣本+試劑1+試劑2（10min）；
測(cè)試使用發(fā)光儀器:科斯邁SMART 500S；可使用于各類吖啶酯體系的化學(xué)發(fā)光儀器（如四川邁克、深圳亞輝龍、山東康華生物、基蛋生物、南京諾爾曼等）
4.2 熒光免疫層析（鑭系元素Eu螯合物填充）平臺(tái)：
待測(cè)抗原:NT-proBNP抗原（貨號(hào)：EKY0089E/EKY0089F）,加樣量10ul
反應(yīng)條件：樣本+熒光液混勻，上樣，反應(yīng)時(shí)間（10min-15min）；
測(cè)試使用熒光儀器:和邁 FIC-S100；可適用于各類熒光體系（激發(fā)波長(zhǎng)365nm，發(fā)射波長(zhǎng)615nm）的儀器（如廣州藍(lán)勃等）
5.產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 推薦配對(duì) |
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被 | EKY0090L-1mg | 氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：EKY0090L-1mg）包被羧基磁珠+氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：EKY0090M-1mg）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光配對(duì)組合1） |
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記 | EKY0090M-1mg | |
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被 | EKY0090P-1mg | 氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：EKY0090Q-1mg）包被羧基磁珠+氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：EKY0090P-1mg）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光配對(duì)組合2） |
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記 | EKY0090Q-1mg | |
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被 | DKY0090O-1mg | 氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記 （貨號(hào)：DKY0090N-1mg）標(biāo)記熒光微球+ 氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：DKY0090O-1mg）劃膜 （熒光層析配對(duì)組合） |
氨基末端腦利鈉肽前體（NT-proBNP）標(biāo)記 | DKY0090N-1mg | |
NT-proBNP抗原 | EKY0089E | Calibrator or Quality Control |
NT-proBNP抗原 | EKY0089F | Calibrator or Quality Control |
氨基末端腦利鈉肽前（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：EKY0090L-1mg）-羧基磁珠濃縮液 | DKY1309A | |
氨基末端腦利鈉肽前（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：EKY0090M-1mg）-吖啶酯濃縮液 | DKY1309B | |
氨基末端腦利鈉肽前（NT-proBNP）包被（貨號(hào)：EKY0090P-1mg）-羧基磁珠濃縮液 | DKY1309D | |
氨基末端腦利鈉肽前（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：EKY0090Q-1mg）-吖啶酯濃縮液 | DKY1309E | |
氨基末端腦利鈉肽前（NT-proBNP）標(biāo)記（貨號(hào)：DKY0090N-1mg）-羧基熒光微球濃縮液 | DKY1309C | |
羧基磁珠(超順磁)，1μm | DEG0091B-1-100mg | |
羧基磁珠(超順磁)，3μm | DEG0091A-3-100mg | |
時(shí)間分辨熒光微球，羧基（200nm） | AEG0786B |
