1.項目背景
1.1呼吸道合胞病毒（RSV）背景介紹
呼吸道合胞病毒（RSV）會引起肺部和呼吸道感染。這種病毒很普遍，大多數兒童在 2 歲前就感染過這種病毒。呼吸道合胞體病毒也可感染成人。在成人和老年人以及健康的兒童中，呼吸道合胞病毒 的癥狀較輕，通常與普通感冒相似。通常只需要采取自我護理措施便可以緩解任何不適。呼吸道合胞病毒 可導致一些人群出現嚴重感染，包括 12 個月及更小的寶寶（嬰兒，特別是早產兒）、老年人、心肺疾病患者或任何免疫系統脆弱（免疫受損）的人群。
1.2什么是RSV
相對于流感、新冠來說，大家對RSV的關注顯得微不足道，但對于嬰兒和老年人來說，RSV病毒可能是致命的。根據美國疾病控制與預防中心的數據，在美國RSV病毒每年導致5.8萬例5歲以下的兒童和17.7萬例65歲及以上的老年人住院，其中，1.3萬例老年人死亡。
呼吸道合胞病毒（RSV）屬于副黏病毒科、肺病毒屬的單股、負鏈RNA病毒。根據基因組序列RSV分為A、B兩種亞型，兩種亞型的毒株可同時引起傳播感染，但一般只有一種亞型的毒株占主導地位。RSV是一種包膜病毒，RSV病毒顆粒直徑100-300nm，基因組長約15.2kb，包含10個基因，編碼11種蛋白質。其中兩個跨膜蛋白G蛋白和F蛋白是病毒的兩個主要保護性抗原。
圖1 RSVRNA基因組（圖源:來自網絡）
融合蛋白（Fusion protein, F）被宿主蛋白酶切割成F1和F2兩個片段后才具有活性，能引起病毒囊膜與宿主細胞膜融合，在RSV感染引發的免疫病理中起作用，是目前抗體、疫苗及其他治療性藥物研發的熱點蛋白。
表面黏附糖蛋白（Attachment glycoprotein, G）主要負責對宿主細胞的附著，使RSV吸附于宿主細胞上導致感染開始。G蛋白在不同菌株間存在差異，保守性不如F蛋白高。核衣殼蛋白（Nucleoprotein, N）包裹病毒基因組，形成核蛋白復合體。
RSV相關蛋白、抗體等試劑在疫苗開發、藥物開發以及診斷試劑開發中的應用。
1.3在診斷試劑開發中的應用
RSV是免疫缺陷人群及嬰幼兒嚴重呼吸道疾病的主要致病因子，在世界范圍內發病率和死亡率都很高。早期和準確的診斷RSV對合適的治療至關重要。
RSV抗原檢測方法常用的有ELISA和免疫熒光法，而基于切向流技術的RSV抗原檢測具有便攜、快速、可實現床旁檢測等優勢。隨著檢測技術的發展，RSV檢測方法的靈敏度和特異性也在不斷提高。而抗原、抗體是免疫學檢測試劑的主要生物活性組分，直接影響檢測結果的特異性和靈敏度。
1.4 RSV傳統的檢測方法
ELISA法和免疫熒光法是傳統的RSV檢測方法。一種低成本的改良ELISA方法已經被開發出來，其檢測RSV 的F蛋白，可以在25分鐘內檢測出RSV。免疫熒光法可以使用熒光標記的一抗或二抗快速檢測RSV抗原。例如，直接熒光抗體法(direct fluorescent antibody assay, DFA)要求標本中有一定數量的細胞，其靈敏度和特異度分別為94%和96.8%，因其簡便、快速而被臨床實驗室廣泛用于RSV的檢測。
另一種快速RSV檢測方法是：基于免疫層析技術的側流免疫分析法(Lateral flow immunoassay，LFIA，使用的是鼻腔洗液或分泌物樣本。目前市場上有許多LFIA試劑盒，如BD Directigen EZ RSV、Binax now RSV、RSV Respi-Strip、Remel Xpect、QuickLab RSV test等。
還有一種就是RCR檢測方法：PCR方法以巢式RT-PCR技術為基礎，利用RSV-A或-B的F基因設計外引物和內引物。該方法已在成人感染的診斷中得到應用。它可以用于檢測低病毒滴度的樣品，并敏感地鑒定使用基于抗原的檢測方法。
西寶生物開發的高質量RSV N重組蛋白和RSV F重組蛋白，可應用于RSV抗原檢測試劑核心原料（抗體對）的制備和篩選，也可做為抗原檢測試劑的質控品。西寶生物研發團隊還篩選出優質的配對抗體為RSV抗原檢測試劑盒開發者保駕護航。
2.測試方案及性能表現
2.1膠體金免疫層析平臺：
2.1.1抗體配對組合：呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828A）標記膠體金（噴在釋放墊上）+呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828B）劃膜；
2.1.2 呼吸道（RSV）合胞病毒抗原（貨號：EKY0217B）用合適的稀釋液依次稀釋到1ug/mL、0.1ug/mL、50ng/mL、10ng/mL、5ng/mL。
2.1.3反應模式：10uL樣品+90uL稀釋液混勻，取80uL混合液上樣，反應時間15min-20min；
2.1.4 實驗結果：在膠體金免疫層析平臺，采用此抗體配對組合測試呼吸道（RSV）合胞病毒抗原稀釋梯度均顯色，測試三例陰性樣品均不顯色，靈敏度可達5ng/mL，表明此抗體配對在膠體金層析平臺測試性能良好。
膠體金層析平臺測試示意圖
2.2彩色乳膠免疫層析平臺：
2.2.1抗體配對組合：呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828B）標記彩色乳膠（噴在釋放墊上）+呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828A）劃膜劃膜；
2.2.2 呼吸道（RSV）合胞病毒抗原（貨號：EKY0217B）用合適的稀釋液依次稀釋到1ug/mL、0.1ug/mL、50ng/mL、10ng/mL、5ng/mL、1ng/mL、0.2ng/mL。
2.2.3反應模式：10uL樣品+90uL稀釋液混勻，取80uL混合液上樣，反應時間15min-20min；
2.2.4 實驗結果：在彩色乳膠免疫層析平臺，采用此抗體配對組合測試呼吸道（RSV）合胞病毒抗原稀釋梯度均顯色，測試三例陰性樣品均不顯色，靈敏度可達0.2ng/mL，表明此抗體配對在彩色乳膠免疫層析平臺測試性能良好。
彩色乳膠層析平臺測試示意圖
3.產品信息
產品名稱 | 貨號 | 推薦配對 |
人呼吸道合胞病毒（RSV）抗體 | EKY0828A | 呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828A）標記膠體金+呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828B）劃膜（膠體金層析配對組合） 呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828B）標記彩色乳膠+呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828A）劃膜（彩色乳膠層析配對組合） |
人呼吸道合胞病毒（RSV）抗體 | EKY0828B | |
呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828A）-膠體金濃縮液 | DKY1325A | |
呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828B）-彩色乳膠濃縮液 | DKY1325B | |
膠體金（40nm，1OD） | DXJ9917B-100ml | |
紅色羧基乳膠微球，400nm | DEG0809A-10ml | |
呼吸道（RSV）合胞病毒抗原 | EKY0217B |
1.項目背景
1.1呼吸道合胞病毒（RSV）背景介紹
呼吸道合胞病毒（RSV）會引起肺部和呼吸道感染。這種病毒很普遍，大多數兒童在 2 歲前就感染過這種病毒。呼吸道合胞體病毒也可感染成人。在成人和老年人以及健康的兒童中，呼吸道合胞病毒 的癥狀較輕，通常與普通感冒相似。通常只需要采取自我護理措施便可以緩解任何不適。呼吸道合胞病毒 可導致一些人群出現嚴重感染，包括 12 個月及更小的寶寶（嬰兒，特別是早產兒）、老年人、心肺疾病患者或任何免疫系統脆弱（免疫受損）的人群。
1.2什么是RSV
相對于流感、新冠來說，大家對RSV的關注顯得微不足道，但對于嬰兒和老年人來說，RSV病毒可能是致命的。根據美國疾病控制與預防中心的數據，在美國RSV病毒每年導致5.8萬例5歲以下的兒童和17.7萬例65歲及以上的老年人住院，其中，1.3萬例老年人死亡。呼吸道合胞病毒（RSV）屬于副黏病毒科、肺病毒屬的單股、負鏈RNA病毒。根據基因組序列RSV分為A、B兩種亞型，兩種亞型的毒株可同時引起傳播感染，但一般只有一種亞型的毒株占主導地位。RSV是一種包膜病毒，RSV病毒顆粒直徑100-300nm，基因組長約15.2kb，包含10個基因，編碼11種蛋白質。其中兩個跨膜蛋白G蛋白和F蛋白是病毒的兩個主要保護性抗原。
圖1 RSVRNA基因組（圖源:來自網絡）
融合蛋白（Fusion protein, F）被宿主蛋白酶切割成F1和F2兩個片段后才具有活性，能引起病毒囊膜與宿主細胞膜融合，在RSV感染引發的免疫病理中起作用，是目前抗體、疫苗及其他治療性藥物研發的熱點蛋白。
表面黏附糖蛋白（Attachment glycoprotein, G）主要負責對宿主細胞的附著，使RSV吸附于宿主細胞上導致感染開始。G蛋白在不同菌株間存在差異，保守性不如F蛋白高。核衣殼蛋白（Nucleoprotein, N）包裹病毒基因組，形成核蛋白復合體。
RSV相關蛋白、抗體等試劑在疫苗開發、藥物開發以及診斷試劑開發中的應用。
1.3在診斷試劑開發中的應用
RSV是免疫缺陷人群及嬰幼兒嚴重呼吸道疾病的主要致病因子，在世界范圍內發病率和死亡率都很高。早期和準確的診斷RSV對合適的治療至關重要。
RSV抗原檢測方法常用的有ELISA和免疫熒光法，而基于切向流技術的RSV抗原檢測具有便攜、快速、可實現床旁檢測等優勢。隨著檢測技術的發展，RSV檢測方法的靈敏度和特異性也在不斷提高。而抗原、抗體是免疫學檢測試劑的主要生物活性組分，直接影響檢測結果的特異性和靈敏度。
1.4 RSV傳統的檢測方法
ELISA法和免疫熒光法是傳統的RSV檢測方法。一種低成本的改良ELISA方法已經被開發出來，其檢測RSV 的F蛋白，可以在25分鐘內檢測出RSV。免疫熒光法可以使用熒光標記的一抗或二抗快速檢測RSV抗原。例如，直接熒光抗體法(direct fluorescent antibody assay, DFA)要求標本中有一定數量的細胞，其靈敏度和特異度分別為94%和96.8%，因其簡便、快速而被臨床實驗室廣泛用于RSV的檢測。
另一種快速RSV檢測方法是：基于免疫層析技術的側流免疫分析法(Lateral flow immunoassay，LFIA，使用的是鼻腔洗液或分泌物樣本。目前市場上有許多LFIA試劑盒，如BD Directigen EZ RSV、Binax now RSV、RSV Respi-Strip、Remel Xpect、QuickLab RSV test等。
還有一種就是RCR檢測方法：PCR方法以巢式RT-PCR技術為基礎，利用RSV-A或-B的F基因設計外引物和內引物。該方法已在成人感染的診斷中得到應用。它可以用于檢測低病毒滴度的樣品，并敏感地鑒定使用基于抗原的檢測方法。
西寶生物開發的高質量RSV N重組蛋白和RSV F重組蛋白，可應用于RSV抗原檢測試劑核心原料（抗體對）的制備和篩選，也可做為抗原檢測試劑的質控品。西寶生物研發團隊還篩選出優質的配對抗體為RSV抗原檢測試劑盒開發者保駕護航。
2.測試方案及性能表現
2.1膠體金免疫層析平臺：
2.1.1抗體配對組合：呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828A）標記膠體金（噴在釋放墊上）+呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828B）劃膜；
2.1.2 呼吸道（RSV）合胞病毒抗原（貨號：EKY0217B）用合適的稀釋液依次稀釋到1ug/mL、0.1ug/mL、50ng/mL、10ng/mL、5ng/mL。
2.1.3反應模式：10uL樣品+90uL稀釋液混勻，取80uL混合液上樣，反應時間15min-20min；
2.1.4 實驗結果：在膠體金免疫層析平臺，采用此抗體配對組合測試呼吸道（RSV）合胞病毒抗原稀釋梯度均顯色，測試三例陰性樣品均不顯色，靈敏度可達5ng/mL，表明此抗體配對在膠體金層析平臺測試性能良好。
膠體金層析平臺測試示意圖
2.2彩色乳膠免疫層析平臺：
2.2.1抗體配對組合：呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828B）標記彩色乳膠（噴在釋放墊上）+呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828A）劃膜劃膜；
2.2.2 呼吸道（RSV）合胞病毒抗原（貨號：EKY0217B）用合適的稀釋液依次稀釋到1ug/mL、0.1ug/mL、50ng/mL、10ng/mL、5ng/mL、1ng/mL、0.2ng/mL。
2.2.3反應模式：10uL樣品+90uL稀釋液混勻，取80uL混合液上樣，反應時間15min-20min；
2.2.4 實驗結果：在彩色乳膠免疫層析平臺，采用此抗體配對組合測試呼吸道（RSV）合胞病毒抗原稀釋梯度均顯色，測試三例陰性樣品均不顯色，靈敏度可達0.2ng/mL，表明此抗體配對在彩色乳膠免疫層析平臺測試性能良好。
彩色乳膠層析平臺測試示意圖
3.產品信息
產品名稱 | 貨號 | 推薦配對 |
人呼吸道合胞病毒（RSV）抗體 | EKY0828A | 呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828A）標記膠體金+呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828B）劃膜（膠體金層析配對組合） 呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828B）標記彩色乳膠+呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828A）劃膜（彩色乳膠層析配對組合） |
人呼吸道合胞病毒（RSV）抗體 | EKY0828B | |
呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828A）-膠體金濃縮液 | DKY1325A | |
呼吸道合胞病毒（RSV）抗體（貨號：EKY0828B）-彩色乳膠濃縮液 | DKY1325B | |
膠體金（40nm，1OD） | DXJ9917B-100ml | |
紅色羧基乳膠微球，400nm | DEG0809A-10ml | |
呼吸道（RSV）合胞病毒抗原 | EKY0217B |
